高速(su)逆(ni)流色譜是一(yi)(yi)種(zhong)連續高效(xiao)的(de)(de)液—液分(fen)配色譜分(fen)離技術， 它不用(yong)任何固態的(de)(de)支撐物或載體。 它利用(yong)兩相溶劑(ji)體系在高速(su)旋轉的(de)(de)螺旋管(guan)內(nei)建(jian)立起一(yi)(yi)種(zhong)**的(de)(de)單向性流體動力學平衡，當其中(zhong)一(yi)(yi)相作為固定(ding)相，另一(yi)(yi)相作為流動相，在連續洗脫的(de)(de)過(guo)程中(zhong)能保(bao)留(liu)大(da)量固定(ding)相。
由(you)于不(bu)(bu)需(xu)要(yao)固體支撐體，物(wu)質的(de)分(fen)離(li)(li)依據其在兩相中分(fen)配系數(shu)的(de)不(bu)(bu)同(tong)而(er)(er)實現，因(yin)而(er)(er)避(bi)免了(le)因(yin)不(bu)(bu)可逆吸附而(er)(er)引起(qi)的(de)樣品(pin)損失、失活(huo)、變性等，不(bu)(bu)僅使(shi)樣品(pin)能夠全(quan)部回(hui)收，回(hui)收的(de)樣品(pin)更能反(fan)映其本來(lai)的(de)特性，適(shi)合(he)于天然生(sheng)物(wu)活(huo)性成(cheng)分(fen)的(de)分(fen)離(li)(li)。而(er)(er)且由(you)于被(bei)分(fen)離(li)(li)物(wu)質與液(ye)態固定相之間能夠充分(fen)接觸，使(shi)得樣品(pin)的(de)制(zhi)備量(liang)大大提高，是一種(zhong)理想的(de)制(zhi)備分(fen)離(li)(li)手段(duan)。
它相對于(yu)傳統(tong)的(de)固—液柱色(se)譜技術(shu)(shu)，具(ju)有適(shi)用(yong)范(fan)圍廣、操作靈活、高(gao)效、快(kuai)速、制備量大(da)、費用(yong)低等優點(dian)。HSCCC 技術(shu)(shu)正(zheng)在(zai)發(fa)展成(cheng)為(wei)(wei)一種(zhong)備受關注的(de)新型分(fen)(fen)離純化技術(shu)(shu)，已經廣泛應(ying)用(yong)于(yu)生物醫藥、天(tian)然(ran)產物、食品(pin)和化妝(zhuang)品(pin)等領域， 在(zai)天(tian)然(ran)產物行業中已被認(ren)為(wei)(wei)是一種(zhong)有效的(de)分(fen)(fen)離技術(shu)(shu)；適(shi)合于(yu)中小分(fen)(fen)子類(lei)物質的(de)分(fen)(fen)離純化。
制備色譜(pu)儀比(bi)較常用的(de)是制備薄層板色譜(pu)(pu)、制備離(li)心(xin)薄層色譜(pu)(pu)、制備干柱薄層色譜(pu)(pu)三個類別。
1、 制備(bei)薄層(ceng)板色譜(pu)
制備板(ban)：一(yi)般(ban)使用(yong)(yong)200X200mm的(de)薄(bo)(bo)層(ceng)色譜板(ban)，吸附劑(ji)厚度為0.5~1mm，一(yi)般(ban)不(bu)超過2m，平(ping)均(jun)1mm厚需要的(de)硅(gui)膠量為15~20g。為了得到低成本、鋪層(ceng)均(jun)勻的(de)高質量制備薄(bo)(bo)層(ceng)板(ban)，建議使用(yong)(yong)上海(hai)科哲公(gong)司(si)的(de)TD-II型(xing)全自動制備薄(bo)(bo)層(ceng)鋪板(ban)機。
點(dian)樣(yang)(yang)(yang)(yang)：制(zhi)備薄(bo)層(ceng)分離(li)的(de)樣(yang)(yang)(yang)(yang)品(pin)量大(da)(da)，一般采用條(tiao)帶點(dian)樣(yang)(yang)(yang)(yang)、不(bu)使用圓(yuan)點(dian)點(dian)樣(yang)(yang)(yang)(yang)；一般1mm厚的(de)硅膠*大(da)(da)約100mg，樣(yang)(yang)(yang)(yang)品(pin)濃度不(bu)宜太稀，應在2~10%為宜。為了得到均(jun)勻而(er)規(gui)則的(de)點(dian)樣(yang)(yang)(yang)(yang)結(jie)果，建議使用上海科哲公司(si)的(de)SP-3型(xing)電動薄(bo)層(ceng)條(tiao)帶點(dian)樣(yang)(yang)(yang)(yang)器。同時展開劑的(de)用量比(bi)較大(da)(da)，點(dian)樣(yang)(yang)(yang)(yang)位置要比(bi)較高
展開：薄層(ceng)色譜層(ceng)析缸(gang)要充分飽和(he)，如制(zhi)備板(ban)(ban)數量較(jiao)多，請選用上(shang)海科哲公司(si)的制(zhi)備薄層(ceng)板(ban)(ban)架；
顯色(se)：一般使(shi)用紫(zi)外燈(deng)或碘蒸(zheng)汽等(deng)非破(po)壞(huai)方式(shi)顯色(se)，或在板邊緣(yuan)進行化學試劑顯色(se)；
回(hui)收(shou)：將檢測到(dao)的樣品連同硅膠一齊刮(gua)下，防入(ru)砂芯漏斗，使用(yong)適當溶(rong)劑(ji)將組(zu)分洗(xi)脫(tuo)(tuo)，將洗(xi)脫(tuo)(tuo)溶(rong)劑(ji)蒸干即(ji)可。一般希望洗(xi)脫(tuo)(tuo)溶(rong)劑(ji)沸點較低，不與組(zu)分發生反應。
制備薄層(ceng)板(ban)色(se)譜優(you)點是(shi)使用(yong)方便、便宜、節(jie)省人力，缺點是(shi)分離時間較長。
2、 制備(bei)離(li)心薄層色(se)譜
與普(pu)通制備板有三個(ge)不同點：
首先：色(se)譜(pu)板(ban)是(shi)圓的，是(shi)徑向色(se)譜(pu)，分(fen)離能(neng)力優于方(fang)板(ban)；
其次(ci)：洗脫(tuo)液的流動(dong)不(bu)靠毛細現象，靠離(li)心(xin)力，減少了分離(li)時間與脫(tuo)尾(wei)，分離(li)效能很(hen)高；
后：洗脫液是連續(xu)流動的，可(ke)以(yi)(yi)非常(chang)容易的形成梯度，并且不需要(yao)刮下吸附層(ceng)，這(zhe)樣可(ke)以(yi)(yi)使(shi)色譜板可(ke)以(yi)(yi)反復(fu)使(shi)用；
所以，制(zhi)備(bei)離(li)(li)心薄層色譜(pu)的分(fen)離(li)(li)效能與分(fen)離(li)(li)速度要遠高于制(zhi)備(bei)薄層板色譜(pu)，建議(yi)采用上海公司科哲公司的KH-CTLC型制(zhi)備(bei)離(li)(li)心薄層色譜(pu)儀(yi)。
3、制(zhi)備干(gan)柱薄層色譜
可以看作(zuo)棒狀的薄層色(se)譜(pu)，優點(dian)(dian)是簡單易(yi)行，快速經濟、制備量大。缺點(dian)(dian)是必須使用可透(tou)紫外的管材，而且在收集樣品時要割斷管材，使費用略高。上海(hai)科哲公司提(ti)供專用的薄層色(se)譜(pu)柱。本方法與(yu)真(zhen)空系統(tong)聯用，構(gou)成減壓真(zhen)空色(se)譜(pu)，性(xing)能會得到進一步提(ti)升。
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