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高速逆流色譜儀的技術特點及應用介紹
點擊次數:1827 更新時間:2022-04-25
高速(su)逆流(liu)色譜法 (High-speed Countercurrent Chromatography,簡稱HSCCC),是一(yi)種連續高(gao)效(xiao)的液液分配色譜(pu)技術(shu),與(yu)其它(ta)色譜(pu)技術(shu)不同(tong)的是它(ta)不需任(ren)何固態載體(ti)(ti),因此(ci)能避免(mian)固相載體(ti)(ti)表面與(yu)樣品發生(sheng)反應(ying)而導致樣品的污(wu)染、失活、變性和不可逆吸(xi)附等(deng)不良影響。同(tong)時它(ta)也具(ju)有適(shi)用范圍廣、快速、進樣量大、費用低、回收率高(gao)等(deng)優點。因此(ci),己在生(sheng)物、醫(yi)藥、食品、材料、化(hua)(hua)妝品和環保等(deng)領(ling)域獲得了廣泛的應(ying)用,尤(you)其是在天然產物活性成分的分離(li)純化(hua)(hua)領(ling)域受重視。
高(gao)速(su)逆流色(se)譜是一種液-液色譜分(fen)離(li)(li)技術,它的(de)固(gu)定相(xiang)和(he)流動相(xiang)都是液體(ti),沒有(you)不(bu)可逆吸附,具有(you)樣品無(wu)(wu)損失、無(wu)(wu)污染、高(gao)效(xiao)、快(kuai)(kuai)速和(he)大制(zhi)備(bei)量(liang)分(fen)離(li)(li)等優點(dian)(dian)(dian)。由于(yu)HSCCC與(yu)傳統(tong)的(de)分(fen)離(li)(li)純化(hua)方(fang)法相(xiang)比具有(you)明(ming)顯的(de)優點(dian)(dian)(dian),因此此項(xiang)技術己被廣泛(fan)應(ying)用于(yu)中(zhong)藥(yao)成分(fen)分(fen)離(li)(li)、保健食品、生物(wu)化(hua)學(xue)、生物(wu)工程、天然產(chan)物(wu)化(hua)學(xue)、有(you)機合成、環境分(fen)析等領域(yu)。它相(xiang)對于(yu)傳統(tong)的(de)固(gu)—液柱色譜技術,具有(you)適(shi)用范圍廣、操作靈活、高(gao)效(xiao)、快(kuai)(kuai)速、制(zhi)備(bei)量(liang)大、費(fei)用低等優點(dian)(dian)(dian)。HSCCC 技術正在發展成為(wei)一種備(bei)受關注的(de)新型分(fen)離(li)(li)純化(hua)技術,已經廣泛(fan)應(ying)用于(yu)生物(wu)醫藥(yao)、天然產(chan)物(wu)、食品和(he)化(hua)妝品等領域(yu), 特別在天然產(chan)物(wu)行(xing)業(ye)中(zhong)已被認為(wei)是一種有(you)效(xiao)的(de)新型分(fen)離(li)(li)技 術;適(shi)合于(yu)中(zhong)小分(fen)子類(lei)物(wu)質的(de)分(fen)離(li)(li)純化(hua)。
高速逆流色(se)譜法的技術特點
1.應(ying)用(yong)范圍廣,適應(ying)性好
由(you)于(yu)溶劑(ji)系統的組(zu)成及配比可以(yi)是無限多的,因而(er)從理論上講可以(yi)適(shi)用于(yu)任(ren)何極(ji)性(xing)范圍內(nei)樣品的分(fen)離,在分(fen)離天然化合物方面具(ju)有其獨(du)到之處(chu)。由(you)于(yu)聚四氟乙烯管中的固定(ding)相(xiang)為液(ye)體(ti)不需要固相(xiang)載體(ti),因而(er)可以(yi)消除固-液(ye)色(se)譜中由(you)于(yu)使用固相(xiang)載體(ti)而(er)帶來的吸附損失,適(shi)用于(yu)分(fen)離極(ji)性(xing)物質。
2.操作簡(jian)便,容易掌握
儀器操作簡單,對樣品的預處理要求(qiu)低,一般(ban)的粗提物即(ji)可進行的制備分(fen)離(li)或分(fen)析(xi)。
3.回(hui)收(shou)率高
不(bu)需要固相(xiang)載體,消(xiao)除了(le)由于樣品在固相(xiang)載體上(shang)的不(bu)可逆吸附和(he)降解造(zao)成的損(sun)失,理(li)論上(shang)樣品的回收(shou)率(lv)可達。在實驗中(zhong)只(zhi)要調(diao)整好分離條件,一般都有很高的回收(shou)率(lv)。
4.重現性(xing)好
如果樣品(pin)不具有較強的表面活性作用,酸堿性也不強,即(ji)使多次進樣,其(qi)分離過(guo)程都保持(chi)很穩(wen)定,而且重現(xian)性相(xiang)當好。
5.分離效率(lv)高,分離量(liang)較大(da)
由于其(qi)與一般的色譜(pu)分離(li)方式不同(tong),能實現(xian)梯(ti)度洗脫(tuo)和反相洗脫(tuo),亦(yi)能進行重復進樣(yang),使(shi)其(qi)特(te)別適用于制(zhi)備性分離(li),產品純度高,制(zhi)備量(liang)大(da)。
6.分配系數
溶劑(ji)系(xi)統的選(xuan)(xuan)擇(ze)是(shi)同時選(xuan)(xuan)擇(ze)色譜分離過程的兩(liang)相(xiang),是(shi)對(dui)樣品成功分離的關鍵所(suo)在,而樣品中各組分的分配系(xi)數(shu)決定(ding)(ding)著這種溶劑(ji)系(xi)統是(shi)否合適,因(yin)此(ci)分配系(xi)數(shu)的測(ce)定(ding)(ding)是(shi)選(xuan)(xuan)擇(ze)溶劑(ji)系(xi)統的重要環節。分配系(xi)數(shu)的測(ce)定(ding)(ding)多采(cai)用(yong)薄(bo)層色譜法、毛(mao)細管電泳法、HPLC法、生物活(huo)性分配比率法及分析型(xing)HSCCC法。