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淺析高速逆流色譜一些特點
點擊次數:1796 更新時間:2022-09-19
高速(su)逆流色譜屬于逆(ni)流(liu)(liu)色(se)譜(pu)的(de)范疇,它的(de)主(zhu)要(yao)分(fen)(fen)離(li)原理是(shi)(shi)利用樣(yang)(yang)品在固(gu)定相(xiang)和(he)流(liu)(liu)動(dong)相(xiang)之間的(de)差異(yi)也就是(shi)(shi)分(fen)(fen)配比不(bu)同而進行(xing)分(fen)(fen)離(li)的(de),值得注意(yi)的(de)是(shi)(shi)逆(ni)流(liu)(liu)色(se)譜(pu)的(de)固(gu)定相(xiang)和(he)流(liu)(liu)動(dong)相(xiang)都是(shi)(shi)液體,其主(zhu)要(yao)優(you)點是(shi)(shi)沒有傳統色(se)譜(pu)的(de)死吸附,樣(yang)(yang)品的(de)回收率高(gao)等(deng)特點。
逆流色譜源(yuan)于逆流分溶(rong)法,也就是用實(shi)驗室(shi)經(jing)常使用的(de)分液漏斗進(jin)行連續的(de)液液萃(cui)取,根(gen)據樣品在兩種互不相溶(rong)的(de)溶(rong)劑(ji)中分配比不同而進(jin)行分離。
高(gao)速(su)逆流色譜(high speed countercurrentchromatography,簡稱HSCCC)是一(yi)種液(ye)-液(ye)色譜分(fen)離技術(shu),它的固定(ding)相和(he)流動相都(dou)是液(ye)體(ti),沒有不可逆吸附,具有樣品無損失(shi)、無污染、高(gao)效、快速和(he)大制備量分(fen)離等優(you)(you)點。由于HSCCC與(yu)傳(chuan)統的分(fen)離純化(hua)方法相比具有明顯的優(you)(you)點,因(yin)此此項技術(shu)己被廣(guang)泛(fan)應用于中藥(yao)成分(fen)分(fen)離、保(bao)健食品、生物化(hua)學、生物工(gong)程、天然產物化(hua)學、有機(ji)合成、環境(jing)分(fen)析等領域。
高速逆流(liu)色譜作為一種分離方法(fa),影(ying)響(xiang)因素(su)主(zhu)要有溶劑體(ti)系的選擇,旋轉速度,流(liu)動相的流(liu)速,溫(wen)度等(deng)影(ying)響(xiang)。
溶劑體系選擇即(ji)條件(jian)的摸索,相(xiang)當于(yu)傳統(tong)色譜(pu)摸流動(dong)相(xiang)的條件(jian),不同的是高速逆(ni)流色譜(pu)條件(jian)的摸索主要是指樣(yang)品(pin)在(zai)固定相(xiang)和流動(dong)相(xiang)兩者之間(jian)的分(fen)(fen)配(pei)的比值(zhi),待分(fen)(fen)離(li)的樣(yang)品(pin)的K值(zhi)*好(hao)(hao)在(zai)0.6~1.5范(fan)圍之內,樣(yang)品(pin)才會(hui)有一(yi)個好(hao)(hao)分(fen)(fen)離(li)效果。
轉速(su)(su)主(zhu)要(yao)體(ti)現在固(gu)定(ding)相(xiang)的保留(liu)率(lv)上,一(yi)般轉速(su)(su)越高固(gu)定(ding)相(xiang)保留(liu)率(lv)也比(bi)較高,分(fen)(fen)離效(xiao)(xiao)果也相(xiang)對的好一(yi)些。流速(su)(su)要(yao)適中,太大(da)會(hui)降低(di)(di)固(gu)定(ding)相(xiang)保留(liu)率(lv),太低(di)(di)會(hui)容易拖尾。溫(wen)度是一(yi)個(ge)非常重要(yao)的參數,溫(wen)度恒定(ding)對體(ti)系的重復性(xing)有著決定(ding)性(xing)的影響,比(bi)如說(shuo)冬天,夏天可(ke)能同(tong)一(yi)個(ge)溶(rong)劑體(ti)系就(jiu)會(hui)有著不同(tong)的分(fen)(fen)離效(xiao)(xiao)果。